编者按：抗微生物药物耐药性已成为全球公共卫生的重大挑战，尤其在尿路感染（UTIs）等常见细菌感染的治疗中，耐药性问题日益加剧。传统的药敏试验耗时较长，使得临床普遍使用广谱抗菌药物进行初始治疗，进一步加剧了耐药性的发展。近年来，快速检测技术的开发为这一困境提供了新的解决方案。在2025年欧洲临床微生物学与感染病学会大会（ESCMID Global 2025）上，多项研究报告了基于尿液样本的快速检测技术在抗菌药物耐药性诊断中的应用潜力。本文筛选其中3项研究进行分享。

 

01

通过尿液快速检测β-内酰胺酶介导的氨基青霉素耐药性

摘要号：O0281

 

尿路感染（UTIs）是人类最常见的细菌感染，主要由大肠埃希菌引起。由于大肠埃希菌对β-内酰胺类药物的耐药性不断增加，因此大多数UTI的治疗依赖广谱抗菌药物，且通常未进行药敏试验。然而，约50%的UTI相关大肠埃希菌菌株仍对β-内酰胺类药物敏感。通过未培养尿液直接检测β-内酰胺酶的产生，可减少广谱抗菌药物的使用。本研究开发了一种新型生化快速检测法（Rapid Amp NP），用于直接从尿液样本中快速评估β-内酰胺酶（即β-内酰胺耐药表型）的产生。

 

该检测方法基于头孢硝噻吩的特性——其水解后颜色发生变化。研究收集了125份来自法国里尔大学医院UTI患者的尿液样本，每份样本用0.22 μm过滤器离心5 mL，随后在滤膜上加入裂解缓冲液和头孢硝噻吩，在37℃下振荡孵育，并在不同时间点读取结果。从样本中分离出菌株，分析其耐药表型和基因特征，并与测试结果进行比较。

 

主要结果：

• 总体而言，β-内酰胺酶活性检测与相应的β-内酰胺酶产生之间的相关性达到了97.6%。仅3份低浓度青霉素酶菌株样本未被归类为耐药，另有2株具有非β-内酰胺酶耐药机制的菌株被归类为敏感。不过，在测试样本中还是可靠地检测到了β-内酰胺酶的产生。

 

结论：该低成本检测可在任何诊断实验室进行，也可作为即时检测进行，结果可在2小时内获得。其应用有助于减少广谱抗菌药物的使用，从而抑制抗菌药物耐药性的传播。

 

02

直接尿液样本中抗菌药物耐药性的快速检测

摘要号：O0282

 

革兰阴性菌抗菌药物耐药性的上升威胁感染的治疗效果，增加了对最后一线抗菌药物的需求，从而增加了过度治疗的风险。本研究旨在将快速ESBL NP检测法（Liofilchem公司）与基于培养的标准药敏试验进行对比，以评估其作为早期耐药性诊断工具的潜力。快速ESBL NP检测通过β-内酰胺环被超广谱β-内酰胺酶（ESBL）水解引起的pH变化来检测耐药性。

 

研究纳入218份来自荷兰两家医院的尿液样本，其中67份含产ESBL细菌，101份含非产ESBL细菌，50份为阴性对照。使用快速ESBL NP检测法检测抗菌药物耐药性，并与标准药敏试验（欧洲药敏试验委员会[EUCAST]）进行比较。计算灵敏度、特异度、阳性预测值（PPV）和阴性预测值（NPV）。

 

主要结果：

• 排除7.3%无法判读的结果后，快速ESBL NP检测的灵敏度为96.8%（95%CI：89.0～99.6），特异度为100%（95%CI：97.4～100.0），PPV和NPV分别为100.0%（95%CI：94.1～100.0）和98.6%（95%CI：94.7～99.6）。检测结果可在1小时内获取。在附加实验中，研究者发现对浑浊尿液样本预先过滤可避免无法解读的情况出现。

 

结论：快速ESBL NP检测可作为筛查临床尿液样本中产ESBL细菌的工具。其快速性（1小时出结果）有助于在等待标准培养结果期间（48～72小时）优化最后一线抗菌药物的使用。如果尿液样本非常浑浊，还可以通过增加一个额外的过滤步骤来优化检测结果。

 

03

使用泌尿生殖道耐药检测试剂盒筛查头孢曲松耐药淋病奈瑟菌

摘要号：O0284

 

头孢曲松耐药淋病奈瑟菌（NG）的增加已成为重大公共卫生问题。澳大利亚AusDiagnostics公司的泌尿生殖道耐药12孔试剂盒（UR12）结合Highplex AllianceTM平台，可直接检测样本中的NG及与头孢曲松耐药相关的A311V突变，特别是penA60等位基因。本研究旨在评估UR12在法国细菌性性传播感染（STI）国家参考中心（NRC）收集的菌株中检测NG及其对三代头孢菌素（3GC）耐药性的性能。

 

UR12试剂盒可检测12种靶标，包括4种STI病原体：沙眼衣原体、淋病奈瑟菌、生殖支原体、阴道毛滴虫。针对NG，该试剂盒可检测特异性基因（opaH和opaJ）及与3GC耐药相关的penA基因突变。研究选取法国NRC的67株NG菌株（含48种penA等位基因和8株头孢曲松耐药A311V突变NG菌株），采用多重PCR和Illumina测序分析。

 

主要结果：

• 在67株NG分离株中，64株（95.5%）同时检出opaJ和opaH，2株（3%）仅检出opaH，1株（1.5%）在自动分析仪上检测出NG阴性。

• 在3GC耐药方面，在8株携带A311V突变（penA60等位基因）的NG菌株中检测到了A311V突变，但在其他11株无该突变的菌株（18.6%）中也检测到了A311V突变。假阳性的出现与penA基因中存在的I312M突变相关，并且主要对应于与3GC敏感性降低相关的马赛克penA34变异体。

 

结论：UR12对NG及A311V突变检测的灵敏度优异（分别为98.5%和100%），然而，A311V突变检测的特异度仅为81%（48/59），这主要是由于非特异性地检测到了与3GC敏感性降低有关的I312M突变，如penA34变异体。有必要进行额外的分析，以便对样品进行评估，目前该检测仍定位于仅用于研究用途（RUO）。

 

▌参考文献：

[1] N. Helsens, C. Duployez, L. Poirel, et al. Rapid detection of beta-lactamase-mediated resistance to aminopenicillins from urines. ESCMID Global 2025; Abstract O0281.

[2] M. Bot, J. Flipse, S. Bongers, et al. Rapid detection of antibiotic resistance in direct urine samples. ESCMID Global 2025; Abstract O0282.

[3] A. Braille, M. Mainardis, F. Meunier, et al. Screening for ceftriaxone-resistant Neisseria gonorrhoeae with the urogenital and resistance kit (AusDiagnostic). ESCMID Global 2025; Abstract O0284.

 

来源：《感染医线》

 

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